Preservación modificada y descripción de la fungalisina para Batrachochytrium dendrobatidis

Barra lateral del artículo

PDF PDF (Inglés)
Publicado: Aug 27, 2022
Actualizado: 2022-08-27
Versiones:
2022-08-27 (2)
DOI: https://doi.org/10.17163/lgr.n36.2022.03
Palabras clave:
Batrachochytrium dendrobatidis, anura, patógeno, zoospora, criopreservación, fungalisina

Contenido principal del artículo

Olga Cristina Lozano Camelo
Universidad Antonio Nariño
https://orcid.org/0000-0001-6563-2365
Adriana Carolina Rojas Arias
Fundación Universitaria Agraria de Colombia
https://orcid.org/0000-0001-5428-7754
Kelly Johanna Ávila Méndez
Universidad Antonio Nariño
https://orcid.org/0000-0002-7155-2924
Silvio Alejandro Lopez-Pazos
Universidad Antonio Nariño
https://orcid.org/0000-0002-3682-4162

Resumen

Batrachochytrium dendrobatidis es un hongo patógeno que causa quitridiomicosis, una afección cutánea que resulta de la reducción de las poblaciones de anuros en todo el mundo, debido a las fungalisinas, su factor de virulencia más importante. Los mapas de B. dendrobatidis (http://www.bd-maps.net/) contienen la información sobre los aislamientos relacionados con B. dendrobatidis. Una alternativa disponible para la reconstitución de cepas de B. dendrobatidis es a partir de células criopreservadas, los métodos para esto se basan en el protocolo de la Organización Mundial de Sanidad Animal (OIE). Recientemente, gran parte del interés en la investigación de B. dendrobatidis se ha centrado en la secuenciación de su ADN, se encuentran disponibles los genomas de B. dendrobatidis JAM81 y B. dendrobatidis JEL423. OBJETIVO. Evaluar una forma modificada del protocolo de la OIE para la criopreservación de cepas de B. dendrobatidis y el análisis in silico de su fungalisina. Se modificó el protocolo de la OIE utilizando la cepa de B. dendrobatidis EV001, enfocado en los ítems de concentraciones de criopreservantes, antibióticos y recuperación, desde -80°C, y evaluación de viabilidad microscópica en agar hidrolizado con triptona y gelatina. Además se utilizó Bioinformática para la determinación de características bioquímicas de la fungalisina de la cepa de B. dendrobatidis JAM81. El protocolo modificado de la OIE resultó útil para la recuperación de la viabilidad de la cepa B. dendrobatidis EV001. La caracterización de la fungalisina de B. dendrobatidis JAM81 mostró un peso molecular de 85 kDa, punto isoeléctrico de 8,33 y estructura terciaria característica que indicó que la proteína es una metaloproteinasa, tiene un dominio PepSY para la inhibición de proteasas, y un dominio catalítico asociado a destrucción de barreras proteicas.

Detalles del artículo

Número
Vol. 36 Núm. 2: (septiembre 2022-febrero 2023).
Sección
Artículo Científico
Creative Commons License

Esta obra está bajo una licencia internacional Creative Commons Atribución-NoComercial-CompartirIgual 4.0.

 Universidad Politécnica Salesiana of Ecuador preserves the copyrights of the published works and will favor the reuse of the works. The works are published in the electronic edition of the journal under a Creative Commons Attribution/Noncommercial-No Derivative Works 3.0 Ecuador license: works can be copied, used, disseminated, transmitted and publicly displayed.

The undersigned author partially transfers the copyrights of this work to Universidad Politécnica Salesiana of Ecuador for the printed edition.

Referencias

Berger, L., R. Speare y A. Hyatt (1999). «Declines and disappearances of Australian frogs». En: Environment Australia. Cap. Chytrid fungi and amphibian declines: overview, implications and future directions, págs. 23-33.

Berger, L. y col. (1998). «Chytridiomycosis causes amphibian mortality associated with population declines in the rain forests of Australia and Central America». En: Proceedings of the National Academy of Sciences 95.15, 9031-9036. Online: https://bit.ly/3wrwXea.

Berger, L. y col. (2005). «Life cycle stages of the amphibian chytrid Batrachochytrium dendrobatidis». En: Diseases of aquatic organisms 68.1, 51-63. Online: https://bit.ly/3kX4oQp.

Boyle, D. y col. (2003). «Cryo-archiving of Batrachochytrium dendrobatidis and other chytridiomycetes». En: Diseases of aquatic organisms 56.1, 59-64. Online: https://bit.ly/3NbJU2p.

Brem, F., M. Parris y G. Padgett-Flohr (2013). «Reisolating Batrachochytrium dendrobatidis from an amphibian host increases pathogenicity in a subsequent exposure». En: PLoS One 8.5, e61260. Online: https://bit.ly/3w3BioN.

Briggs, C. y S. Burgin (2004). «Congo Red, an effective stain for revealing the chytrid fungus, Batrachochytrium dendrobatidis, in epidermal skin scrapings from frogs». En: Mycologist 18.3, 98-103. Online: https://bit.ly/3L16jhf.

Campbell, C. y col. (2012). «Frog skin epithelium: electrolyte transport and chytridiomycosis». En: The international journal of biochemistry & cell biology 44.3, 431-434. Online:https : / / bit . ly / 3P9bcZ7.

De León, M. y col. (2019). «Batrachochytrium dendrobatidis infection in amphibians predates first known epizootic in Costa Rica». En: PLoS One

12, e0208969. Online: https://bit.ly/3FFjRhA.

Duellman, W. (1988). «Patterns of species diversity in anuran amphibians in the American tropics». En: Annals of the Missouri Botanical Garden 14.2, 79-104. Online: https://bit.ly/3Fz8AiC.

Fernández, D. y col. (2013). «A functional and structural study of the major metalloprotease secreted by the pathogenic fungus Aspergillus fumigatus». En: Acta Crystallographica Section D: Biological Crystallography 69.10, 1946-1957. Online: https://bit.ly/38f3lso.

Fisher, M. y T. Garner (2020). «Chytrid fungi and global amphibian declines». En: Nature Reviews Microbiology 18.6, 332-343. Online: https://go.nature.com/3svcXpL.

Flechas, S. y col. (2012). «Surviving chytridiomycosis: differential anti-Batrachochytrium dendrobatidis activity in bacterial isolates from three lowland species of Atelopus». En: PloS one 7.9, e44832. Online: https://bit.ly/3yvN4d3.

Flechas, S. y col. (2013). «Characterization of the first Batrachochytrium dendrobatidis isolate from the Colombian Andes, an amphibian biodiversity hotspot». En: EcoHealth 10.1, 72-76. Online: https://bit.ly/3w5GrfO.

Flechas, S. y col. (2017). «Current and predicted distribution of the pathogenic fungus Batrachochytrium dendrobatidis in Colombia, a hotspot of amphibian biodiversity». En: Biotropica 49.5, 685-694. Online: https://bit.ly/3yvFDmn.

Garcés, E. y col. (2003). Morfología y clasificación de los hongos. Unibiblos.

Green, D., M. Gray y D. Miller (2010). «Amphibian Ecology and Conservation: A handbook of techniques». En: Oxford, University Press. Cap. Disease monitoring and biosecurity, págs. 481-501.

Greenberg, D., W. Palen y A. Mooers (2017). «Amphibian species traits, evolutionary history and environment predict Batrachochytrium dendrobatidis infection patterns, but not extinction risk». En: Evolutionary applications 10.10, 1130-1145. Online: https://bit.ly/3N8RBXa.

Kilpatrick, A., C. Briggs y Pe. Daszak (2010). «The ecology and impact of chytridiomycosis: an emerging disease of amphibians». En: Trends in ecology & evolution 25.2, 109-118. Online: https://bit.ly/37DRhk2.

Leck, A. (1999). «Preparation of lactophenol cotton blue slide mounts». En: Community Eye Health 12.30, 24. Online: https://bit.ly/3sse8pT.

Lindauer, A. y col. (2019). «Quantifying Batrachochytrium dendrobatidis and Batrachochytrium salamandrivorans viability». En: EcoHealth 16.2, 346-350. Online: https://bit.ly/3ssGwrI.

Lynch, J., P. Ruiz-Carranza y M. Ardila-Robayo (1997). «Biogeographic patterns of Colombian frogs and toads (Patrones biogeográficos de las ranas y los sapos de Colombia)». En: Revista de la Academia Colombiana de Ciencias Exactas, Físicas y Naturales 21.N80, págs. 237-248.

McDonald, C. y col. (2020). «Gene expression varies within and between enzootic and epizootic lineages of Batrachochytrium dendrobatidis (Bd) in the Americas». En: Fungal Biology 124.1, 34-43. Online: https://bit.ly/3MiCXME.

OIE-World Organization for Animal Health (2012). «Manual of Diagnostic Tests for Aquatic Animals». En: World Organization for Animal Health. Cap. Infection with Batrachochytrium dendrobatidis. Págs. 1-18.

Piotrowski, J., S. Annis y J. Longcore (2004). «Physiology of Batrachochytrium dendrobatidis, a chytrid pathogen of amphibians». En: Mycologia 96.1, 9-15. Online: https://bit.ly/3ssugYC.

Richmond, J. y col. (2009). «Toward immunogenetic studies of amphibian chytridiomycosis: linking innate and acquired immunity». En: Bioscience 59.4, 311-320. Online: https://bit.ly/37DWCb4.

Robinson, K. y col. (2020). «Isolation and maintenance of Batrachochytrium salamandrivorans cultures». En: Diseases of aquatic organisms 140, 1-11. Online: https://bit.ly/3kYRy3Y.

Rosenblum, E. y col. (2008). «Global gene expression profiles for life stages of the deadly amphibian pathogen Batrachochytrium dendrobatidis». En: Proceedings of the National Academy of Sciences 105.44, 17034-17039. Online: https://bit.ly/39V13yY.

Rosenblum, E. y col. (2009). «Genome-wide transcriptional response of Silurana (Xenopus) tropicalis to infection with the deadly chytrid fungus». En: PloS one 4.8, e6494. Online: https://bit.ly/3ssXneg.

Rosenblum, E. y col. (2010). «A molecular perspective: biology of the emerging pathogen Batrachochytrium dendrobatidis». En: Diseases of aquatic organisms 92.2-3, 131-147. Online: https://bit.ly/3w46Jzj.

Rueda-Almonacid, J., J. Lynch y A. Amézquita (2004). Libro Rojo de los Anfibios de Colombia. Conservación Internacional Colombiana.

Scheele, B.C. y col. (2019). «Amphibian fungal panzootic causes catastrophic and ongoing loss of biodiversity». En: Science 6434.363, 1459-1463. Online: https://doi.org/10.1126/science.aav0379.

Slifkin, M. y R. Cumbie (1988). «Congo red as a fluorochrome for the rapid detection of fungi». En: Journal of Clinical Microbiology 26.5, 827-830. Online: https://bit.ly/3L3Poe8.

Sluijs, A. Spitzen-van der y col. (2017). «Fragile coexistence of a global chytrid pathogen with amphibian populations is mediated by environment and demography». En: Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences 284.1864, 20171444. Online: https://bit.ly/3sufIHQ.

Strauss, A. y K. Smith (2013). «Why does amphibian chytrid (Batrachochytrium dendrobatidis) not occur everywhere? An exploratory study in Missouri ponds». En: PloS one 8.9, e76035. Online: https://bit.ly/3Pcpc45.

Vásquez-Ochoa, A. y col. (2012). «Detección y cuantificación de Batrachochytrium dendrobatidis en anfibios de las regiones andina central, oriental, Orinoquia y Amazonia de Colombia». En: Herpetotropicos 8.1-2, 13-21. Online: https://n9.cl/qd3q4.

Velásquez, E. y col. (2008). «Infección por el hongo quitrido Batrachochytrium dendrobatidis en anuros de la cordillera occidental de Colombia». En: Herpetotropicos 4.2, 65-70. Online: https://n9.cl/wrh4y.

Vredenburg, V. y col. (2010). «Dynamics of an emerging disease drive large-scale amphibian population extinctions». En: Proceedings of the National Academy of Sciences 107.21, 9689-9694. Online: https://bit.ly/3Nd79Jv.