Artículo científico / Scientific paper
BIOTECNOLOGÍA
pISSN:1390-3799; eISSN:1390-8596
https://doi.org/10.17163/lgr.n41.2025.07
IDENTIFICACIÓN DE UN PÉPTIDO ANTIMICROBIANO DE
CHAMAEMELUM NOBILE
IDENTIFICATION OF AN ANTIMICROBIAL PEPTIDE FROM CHAMAEMELUM
NOBILE
Diana Daniela Portela Dussán1, Sandra Mónica Estupiñan Torres2y Silvio
Alejandro Lopez-Pazos1*
1Faculty of Sciences, Universidad Antonio Nariño, Carrera 3 Este 47A-15, Bogotá D.C., Colombia.
2Faculty of Health Sciences, Universidad Colegio Mayor de Cundinamarca, Calle 28 No. 5B-02 Bogotá D.C., Colombia.
*Autor para correspondencia: alejandrolopezpazos@uan.edu.co
Manuscrito recibido el 14 de julio de 2023. Aceptado, tras revisión, el 02 de abril de 2024. Publicado el 1 de marzo de 2025.
Resumen
Chamaemelum nobile, o manzanilla romana, es una planta que contiene propiedades antiinflamatorias y antimicrobia-
nas. Los péptidos antimicrobianos (AMP) son parte del sistema de defensa de las plantas, que incluye a los péptidos de
transferencia de lípidos (LPT). Nuestro objetivo es identificar una proteína relacionada con LTP de C. nobile (cnLTP).
Se realizó la PCR sobre el ADN de C. nobile para la identificación del gen cnLTP; se utilizó bioinformática para su
caracterización, y una prueba de sensibilidad contra Rhizoctonia solani. cnLTP tiene 99 aminoácidos, 9,8 kDa, punto
isoeléctrico de 9,39, 33 residuos alifáticos, índice alifático de 85, hidropaticidad de 0,127, cuatro hélices alfa y cuatro
puentes disulfuro. Se encontró que el fluido apoplásico de C. nobile (1 µg/mL) inhibe el desarrollo de R. solani. Este
estudio contribuye al conocimiento de un LTP novedoso y no caracterizado, utilizando enfoques in silico y experimen-
tales.
Palabras clave: Manzanilla romana, péptido antimicrobiano, proteína de transferencia de lípidos, Rhizoctonia solani.
Abstract
Chamaemelum nobile, or Roman chamomile, is a plant containing anti-inflammatory and antimicrobial properties. Anti-
microbial peptides (AMPs) are part of the plant defense system including lipid transfer peptides (LPTs). Our objective
is to identify a LTP-related protein from C. nobile (cnLTP). PCR was performed on C. nobile DNA for identifying cnLTP
gene. Bioinformatics was used for their characterization, and a sensitivity test was carried out on Rhizoctonia solani.
cnLTP has 99 amino acids, 9.8 kDa, isoelectric point of 9.39, 33 aliphatic residues, aliphatic index of 85, hydropathicity
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Identificación de un péptido antimicrobiano de Chamaemelum nobile
of 0.127, four alpha-helices and four disulfide bridges. An inhibitory activity of apoplastic fluid of C. nobile was deter-
mined at 1 µg/mL on R. solani. This study contributes in the knowledge of a novel and non-characterized LTP using
in silico and experimental related approaches.
Keywords: Roman chamomile, Antimicrobial peptide, Lipid transfer protein, Rhizoctonia solani.
Forma sugerida de citar: Portela Dussán, D., Estupiñan Torres, S. y Lopez-Pazos, S. (2025). Identificación de un
péptido antimicrobiano de Chamaemelum nobile. La Granja: Revista de Ciencias de la
Vida. Vol. 41(1):118-126. https://doi.org/10.17163/lgr.n41.2025.07.
IDs Orcid:
Diana Daniela Portela Dussán: https://orcid.org/0000-0003-2949-7033
Sandra Mónica Estupiñan Torres: https://orcid.org/0000-0002-6937-4567
Silvio Alejandro Lopez-Pazos: https://orcid.org/0000-0002-3682-4162
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Artículo científico/Scientific paper
BIOTECNOLOGÍA Portela Dussán, D., Estupiñan Torres, S. y Lopez-Pazos, S.
1 Introducción
Las proteínas relacionadas con la patogénesis (PR)
se pueden detectar a nivel basal en los tejidos sanos
de las plantas, pero aumentan su presencia ante el
ataque de patógenos. La activación de las PR puede
comenzar solo después de una fase de interacción
de la planta-patógeno, a partir del reconocimiento
de patrones moleculares asociados con microorga-
nismos (PAMPs) por receptores de reconocimiento
de estos patrones (PRR) presentes en la membrana
celular de las plantas, o mediante el reconocimien-
to de elicitores como proteínas con dominios de
unión a nucleótidos y repeticiones ricas en leucina
(NB-LRR). La concentración de PRs aumenta con
la transducción de señales químicas como el ácido
salicílico, el etileno y el ácido jasmónico durante la
primera etapa de activación de los mecanismos de
defensa (Zhou and Zhang, 2020; Boyd et al., 2013).
Los péptidos antimicrobianos (AMPs) son una par-
te de las PRs, tienen un peso molecular menor a
10 kDa y una actividad antimicrobiana in vitro. Los
AMPs se producen por microorganismos, animales
y plantas como mecanismo de defensa contra los
patógenos (Bin Hafeez et al., 2021).
Los AMPs tienen menos de 200 aminoácidos, se
expresan constitutivamente y se inducen en tejidos
susceptibles como primordios foliares, estomas y
epidermis. Por ejemplo, en Nicotiana megalosiphon
se evidenció que tras la inoculación con Peronospo-
ra hyoscyami sp. tabacina expresó en hojas un gen
de defensina, y en Brassica oleracea inoculada con
Xanthomonas campestris pv. campestris se expresaron
genes de AMPs en tallo y hojas; también se obser-
que el pimiento inoculado con X. campestris pv.
vesicatoria provocó una alta transcripción en el gen
CaAMP1, y su expresión generó tolerancia a Phy-
tophthora sojae (Sharma et al., 2022; Niu et al., 2020;
Jiang et al., 2011; Portieles et al., 2010). Se ha eviden-
ciado que los AMPs catiónicos como las tioninas al-
fa/beta, defensinas y los péptidos de transferencia
de lípidos (LTPs) interactúan con grupos aniónicos
de la bicapa fosfolipídica en los microorganismos.
También se forman micelas que permiten el flujo de
iones hacia el espacio extracelular con descompen-
sación osmótica, lisis celular y muerte (Kovaleva
et al., 2020).
Los AMPs aniónicos, como los ciclotidos, in-
teractúan con la membrana citoplasmática de los
patógenos a través de fuerzas electrostáticas en-
tre los residuos polares de un AMP y las cabezas
hidrofílicas de los fosfolípidos, mediante el recono-
cimiento de la columna vertebral quiral del glice-
rol. La fuerza electrostática de esta unión compleja
está determinada por una interacción iónica entre
el grupo amonio de la fosfatidiletanolamina y el
grupo carboxilo de un glutamato conservado del
bucle 1 del AMP (Venkatesan and Roy, 2023; Troei-
ra Henriques and Craik, 2017). La permeabilización
sufrida por la membrana citoplasmática en la inter-
acción microorganismo/AMP no es del todo clara.
Se han descrito cuatro posibles mecanismos: (i) hé-
lices peptídicas que forman un haz en la membrana
con un lumen central, (ii) los AMPs se acumulan en
la superficie de la bicapa lipídica interactuando con
las cabezas hidrofílicas de los fosfolípidos, cubrien-
do la membrana como una alfombra y causando la
desorganización de la bicapa lipídica, (iii) los AMPs
se insertan en la membrana, formando un poro e
induciendo una flexión continua de la monocapa
lipídica, lo que provoca que la superficie hidrófo-
ba de la membrana se oriente hacia el exterior y la
superficie hidrofílica hacia el interior, formando un
canal acuoso con pérdida de polaridad, (iv) el AMP
provoca un desplazamiento competitivo de Ca2+ y
Mg2+ (Boparai and Sharma, 2020; Li et al., 2012).
La manzanilla romana Chamaemelum nobile (L.)
es una hierba perenne aromática, con un tallo rami-
ficado y alargado que alcanza una altura de entre
20 y 30 cm, que sostiene una cabeza floral formada
por hojas blancas con lígulas segmentadas y folíolos
bien definidos. Crece en zonas templadas, es adap-
table y se utiliza en varios tipos de suelos ácidos con
suficiente agua. C. nobile. Contiene entre un 0,24%
y 1,9% de aceites volátiles y alrededor de 120 meta-
bolitos secundarios, incluidos flavonoides (querce-
tina, luteolina, apigenina, patuletina), alfa-bisabolol
y óxidos de bisabolol A y B, azulenos (camazuleno),
monoterpenos (alfa-pineno), sesquiterpenos (farne-
seno), cumarinas (herniarina y umbeliferona). Su
composición le otorga posibles propiedades tera-
péuticas reconocidas (antiinflamatorias, espasmolí-
ticas, sedantes, antioxidantes, anticoagulantes, anti-
hiperlipidémicas, repelentes y antimicrobianas).
La producción mundial de C. nobile supera las
1000 toneladas/año. Se utilizan 800 kg de tallo flo-
ral/ha para producir entre 0,8% y 1,5% de aceites
esenciales. De igual forma, se pueden obtener com-
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puestos fenólicos y alcanos de las semillas, frutos o
raíces. Los aceites de C. nobile son efectivos in vitro
contra Staphylococcus aureus (0,1 mg/mL), Escheri-
chia coli (0,1 mg/mL), Bacillus subtilis (0,05 mg/mL),
Pseudomonas aeruginosa (12,5 y 25 mg/mL), P. tolaa-
sii (300 mg/mL), Candida albicans (0,1 mg/mL), y
hongos como Aspergillus candidus,Penicillium sp.,
Fusarium culmorum yA. niger (900 mg/mL) (Ghaedi
et al., 2015; Kazemian et al., 2015; Srivastava et al.,
2010; Saderi et al., 2005).
El objetivo de esta investigación fue encontrar
un AMP catiónico de C. nobile (denominado cnLTP)
enfocado en identificar la secuencia de ADN de un
LTP. Los parámetros a utilizar fueron las pruebas
bioinformáticas y moleculares, y la evaluación so-
bre Rhizoctonia solani, que es un patógeno de la pa-
pa.
2 Materiales y Métodos
2.1 Cultivo de C. nobile
Se utilizaron semillas comerciales de manzanilla ro-
mana en un medio de propagación (Mezcla de Sales
y Vitaminas de Murashige y Skoog (MS) suplemen-
tado con 20 mg/L de sacarosa, 0,1 mg/L de bencila-
minopurina (BAP), 0,5 mg/L de ácido naftalenoacé-
tico (ANA), 0,25 mg/L de ácido giberélico (GA3)).
Las semillas se mantuvieron en condiciones de tem-
peratura constante (20 C) y humedad (70%).
2.2 PCR para la detección del gen cnLTP
Para extraer el ADN, se sumergieron las hojas de
C. nobile de plántulas in vitro en un tubo que conte-
nía tampón de lisis (200 mM Tris HCl pH 7,5, 250
mM NaCl, 25 mM EDTA, 0,5% SDS), solución de
precipitación (isopropanol) y tampón TE 1X como
diluyente (Edwards et al., 1991). Se realizó PCR uti-
lizando 1X tampón PCR, 2,5 mM de MgCl2, 0,2 mM
de dNTPs, 0,4 µM de cada cebador y 0,2 U de Taq
ADN polimerasa. Las condiciones del ciclo térmico
fueron: una fase de desnaturalización a 95 C du-
rante 5 min, seguida de 30 ciclos consistentes en
desnaturalización (95 C por 1 min), alineamiento
(50 C por 1 min), extensión (72 C por 1 min) y una
extensión final (72 C por 5 min).
Los productos de PCR se determinaron me-
diante electroforesis en gel de agarosa al 1,2%
y se secuenciaron (Macrogen, EE. UU.). Los ce-
badores directo e inverso para LTP fueron 5’-
GACTGCTCAACGGTTCAGTAAAGTTGA-3’ y 5’-
TCAACTTTACTGAACCGTTGAGCAGTC-3’, res-
pectivamente (Rojas, 2010). Los datos de la se-
cuencia obtenida se depositaron en GenBank (ID:
MT294300).
2.3 Caracterización in silico de cnLTP
Se empleó la secuencia de nucleótidos de cnLTP
para obtener su secuencia de aminoácidos, utili-
zando la herramienta "Translate"del servidor Ex-
pasy (http://web.expasy.org/translate/) (Artimo
et al., 2012). Para prever el posible rol del AMP,
se realizó un análisis comparativo usando BLASTp
(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLASTp/) (Shah
et al., 2018) para encontrar secuencias similares
en bases de datos de proteínas. La anotación bio-
química de cnLTP se realizó usando ProtParam
(https://web.expasy.org/protparam/) (Artimo
et al., 2012). El modelado por homología de cnLTP
se llevó a cabo utilizando el servidor I-TASSER
(https://zhanglab.ccmb.med.umich.edu/I-TASSER
/) (Zhang, 2009). El mejor resultado obtenido en la
anotación de cnLTP fue para un LTP de Nicotia-
na tabacum, que se utilizó como plantilla (PDB ID:
1T12A; 73% de identidad, 91% de cobertura de con-
sulta; valor E de 7e-43). Las figuras se realizaron con
DeepView (https://spdbv.vital-it.ch/) (Johansson
et al., 2012).
2.4 Prueba de susceptibilidad de R. solani
utilizando fluido apoplástico de C. no-
bile
El fluido de lavado apoplástico (AWF) de C. nobile
se extrajo de hojas (Butt et al., 2019; Gentzel et al.,
2019). Primero, se lavaron las hojas maduras (1g)
con agua destilada estéril para eliminar los exuda-
dos citoplasmáticos de las células dañadas, y luego
se determinó el peso fresco. Los segmentos de hojas
se infiltraron en un frasco que contenía 250 mL de
agua destilada estéril a 4 C y presión de vacío de
20 kPa, lo que permite que el aire escape y facilite el
flujo de agua en el espacio intercelular, lavando las
moléculas de AWF. Una vez completado el método
de presión, el frasco se agitó lentamente hasta libe-
rar aire y vacío para reducir la lisis celular y evitar
la contaminación citoplasmática.
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La presión de vacío se repitió hasta que las hojas
quedaron completamente infiltradas, volviéndose
de color oscuro. El AWF se recuperó de los segmen-
tos de hojas secados con papel de laboratorio suave
y envueltos en parafilm; luego, se centrifugaron a
4C, 10,000 rpm durante 10 min. Se utilizó el en-
sayo de Bradford para medir la concentración de
proteínas (Bradford, 1976). La evaluación de la ca-
lidad de los péptidos de AWF se realizó mediante
tricina-SDS-PAGE. Se completó la evaluación pre-
liminar de la actividad biológica del AWF sobre R.
solani utilizando 10 cm del micelio que se cultivó en
medio PDA, y se añadieron carriles de AWF a cada
lado, extendiéndose más allá de los extremos de la
estructura fúngica existente en una base decreciente
gradual, utilizando concentraciones de 0,1 µg/mL a
1µg/mL.
Se utilizó una suspensión de la cepa PAO1 de
P. aeruginosa como control positivo (control negati-
vo: agua en lugar de AWF como muestra, datos no
mostrados). El R. solani se incubó durante cinco días
a 30 C. Se midió el efecto de las proteínas del AWF
en R. solani mediante el desplazamiento del micelio
en la placa de Petri.
3 Resultados
Las semillas de manzanilla romana se cultivaron en
un medio MS suplementado con hormonas de creci-
miento con el objetivo de inducir la germinación y el
crecimiento de plántulas adecuadas para la extrac-
ción de ADN genómico. La PCR identificó un pro-
ducto de aproximadamente 300 pb, que pudo ser
determinado mediante secuenciación. Esta secuen-
cia se comparó con las entradas de nucleótidos re-
gistradas en la base de datos GenBank utilizando
el programa BLAST (Shah et al., 2018). La secuen-
cia de ADN (297 pb) mostró una estrecha relación
con los LTPs de tomate (identidad 96%, valor E 4e-
57, cobertura 96%, NCBI). Este conocimiento, a su
vez, permitió deducir la secuencia del cnLTP (99 re-
siduos) que codifica el ADN y que contiene única-
mente secuencias de ADN codificante para el pép-
tido maduro, sin señal peptídica ni sitio de poliade-
nilación. La secuencia de aminoácidos en el cnLTP
y, por lo tanto, la función de la proteína, está deter-
minada por ocho residuos de C que están enlazados
en cuatro puentes disulfuro (Figura 1A).
Figura 1. Estructura de cnLTP. A. Alineación de dos LTPs de tomate con cnLTP, asociada con propiedades fisicoquímicas según
Clustal Omega (Sievers and Higgins, 2014): en rojo, aminoácidos pequeños e hidrofóbicos (junto con aromáticos -Y); en azul,
ácidos; en magenta, básicos H; en verde, hidroxilo, sulfhidrilo, amina y G; en gris, aminoácidos e iminoácidos inusuales. B.
Modelo 3D de cnLTP, la flecha negra indica el terminal N, la flecha blanca señala el terminal C. Las hélices están indicadas y
coloreadas en negro.
El peso molecular teórico del cnLTP es de 9,8
kDa y su punto isoeléctrico es de 9,39. Además, el
péptido está compuesto por 33 residuos alifáticos
(A, V, I y L), el índice alifático del cnLTP es 85, el
cual determina el volumen ocupado por cadenas
laterales alifáticas, y contiene 12 residuos cargados
positivamente debido a la conformación catiónica
del cnLTP a pH neutro, y tres residuos cargados ne-
gativamente. La hidropatía es 0,127, lo que indica la
presencia de una cavidad hidrofóbica donde tam-
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bién ocurre la interacción con lípidos. El cnLTP está
formado por cuatro alfa-hélices. La primera hélice
(P2-Q24) presenta una estructura H1A (P2-S5) for-
mada por dos pliegues en His3 y Gly4, y H1B (P18-
L23) formada por cuatro pliegues en Q11, G15, C19
y Y22. La segunda hélice H2 (C32-L39) contiene tres
pliegues en R34, G35 y L39. La tercera hélice H3
(P46-A62) comprende siete pliegues en D48, K50,
A52, T54, L56, K57, A59 y N61. La cuarta hélice H4
(L68-C78) encierra pliegues en G69, I74 y S76. Las
cuatro alfa-hélices están conectadas por tres bucles
cortos, L1 (G25-G31), L2 (L40-T45) y L3 (I63-N67)
(Figura 1B). El cnLTP está estabilizado por cuatro
puentes disulfuro formados entre C9-C33, C19-C55,
C32-C78 y C53-C92, los cuales se calcularon me-
diante DISULFIND (http://disulfind.dsi.unifi.it/)
(Ceroni et al., 2006). El cnLTP contiene 50 residuos
hidrofóbicos: A, V, L, I, P, F y C, estando la mayoría
en el interior del péptido, formando una cavidad
hidrofóbica, lo que es característico de esta familia
de AMPs (Li et al., 2012).
La evaluación biológica del fluido apoplástico
de C. nobile se llevó a cabo teniendo en cuenta la
concentración de proteínas (2,37 mg/mL), así como
la presencia intrínseca de péptidos de bajo peso mo-
lecular, de aproximadamente 10 kDa, lo que indica-
ría que son LTPs (Figura 2A). Las pruebas de an-
tagonismo indicaron un efecto inhibitorio sobre R.
solani a una concentración de 1 µg/mL (Figuras 2B-
2C).
Figura 2. Bioensayo del AWF de C. nobile en R. solani. A. Tricina SDS-PAGE mostró una banda de 10 kDa relacionada con
LTPs en el AWF de C. nobile (líneas 1 y 2, M es el marcador de peso molecular). B. Control positivo que contiene carriles con
suspensión de la cepa P. aeruginosa PAO1 (flechas negras). C. Micelio de R. solani con carriles de AWF de C. nobile a cada lado,
que se fueron extendiendo gradualmente en el medio; los cuadros muestran las áreas de inhibición.
4 Discusión
Los péptidos permiten que las bacterias evadan la
defensa del huésped y se proliferen al impedir la
señalización celular, la migración celular e incluso
pueden matar directamente las células de respuesta.
Los péptidos tienen mecanismos de daño complejos
sobre las membranas celulares (ruptura), la síntesis
de proteínas (inhibición), los segundos mensajeros
(activación) o la respuesta de defensa (activación)
(Yang and Yousef, 2018). Hasta ahora, se ha suge-
rido que una caracterización bioquímica específica
enfocada en la actividad biológica específica o un
diseño asistido por computadora son vías para el
descubrimiento de nuevas opciones biotecnológi-
cas (Rondon-Villarreal and Pinzon-Reyes, 2018).
En los LTPs, una secuencia señal es la respon-
sable de dirigir el péptido hacia la membrana cito-
plasmática, donde es llevada en el extremo N por
una aminopeptidasa, y el péptido maduro se expor-
ta al espacio intercelular, donde ejerce su actividad
biológica (Pagnussat et al., 2012). El cnLTP maduro
tiene una sustitución conservada (T-S), además de
dos sustituciones semiconservadas (E-S, N-S). Se ha
informado que la conservación del sitio de fosfori-
lación de S (que podría ser intercambiado por T o E
fosforilables) sería uno de los residuos clave para el
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plegamiento de la proteína (Pearlman et al., 2011).
La presencia de la cavidad hidrofóbica es esencial
en la familia de los LTPs, ya que permite la unión
y transferencia de lípidos, por ejemplo, un LTP de
trigo que tenía una cavidad hidrofóbica capaz de
atraer prostaglandina B2 y movilizarla entre frac-
ciones microsomales y mitocondrias. La cavidad
hidrofóbica de los LTP puede unirse a ácidos grasos
saturados (12–19 átomos de carbono), ácidos gra-
sos insaturados de diferentes longitudes de cadena
(16–18 átomos de carbono) y geometría de insatura-
ción, lisolípidos (14–16 átomos de carbono) y ácido
jasmónico (Melnikova et al., 2016; Tassin-Moindrot
et al., 2000).
Los LTPs se dividen en dos grupos según su
peso molecular y conformación estructural: (i) tipo
1 (9-10 kDa), que están formados por cuatro alfa-
hélices y se caracterizan por tener actividad inhibi-
toria sobre fitopatógenos; (ii) tipo 2 (7,0 kDa), que
también están formados por cuatro alfa-hélices, pe-
ro no muestran actividad inhibitoria sobre los pató-
genos de las plantas (Finkina et al., 2016). El cnLTP
pertenece al tipo 1 de los LTPs, en particular por su
peso molecular (9.8 kDa) y sus cuatro alfa-hélices.
Los LTPs tienen actividad biológica contra bacterias
y hongos como Clavibacter michiganensis, P. solana-
cearum, P. syringae, Alternaria brassicola, Ascochyta pi-
si, Colletotrichum lindemuthianum, F. solani, F. grami-
nearum, F. culmorum, F. oxysporum, Botrytis cinerea,
Sclerotinia sclerotiorum, Verticillium dahliae (Finkina
et al., 2016). Las pruebas de antagonismo indica-
ron un efecto inhibitorio del AWF de C. nobile so-
bre R. solani, por ejemplo, se ha evaluado la activi-
dad antimicrobiana de los aceites de C. nobile sobre
Penicillium sp. y Aspergillus sp. (Sharifzadeh et al.,
2016). La localización de un LTP en la pared celu-
lar y su externalización hacia el espacio intercelular
por una secuencia señal sugiere su presencia en el
fluido apoplástico, como se ha evidenciado en Ara-
bidopsis thaliana,B. oleracea,Ricinus communis yVig-
na unguiculata (Missaoui et al., 2022). Se aislaron dos
LTPs (IWFI e IWFI2) del fluido de lavado intercelu-
lar de Beta vulgaris con actividad antifúngica sobre
Cercospora beticola, demostrando su presencia en el
AWF (Nielsen et al., 1996). I-TASSER puede indicar-
nos cómo el cnLTP interactúa con componentes ce-
lulares; por ejemplo, el cnLTP puede unirse quími-
camente al ácido palmítico, ya que este constituye
el 30% de todos los fosfolípidos (Carta et al., 2017).
5 Conclusiones
Este proyecto exploró el problema de la identifica-
ción y caracterización de nuevos AMPs de C. nobile.
Se encontraron características relevantes del cnLTP
(por ejemplo, la cavidad hidrofóbica o los puentes
disulfuro); de igual forma, se analizó su actividad
sobre R. solani. Finalmente, las plantas medicinales
como C. nobile pueden ser una fuente interesante de
AMPs para ser utilizados en Biotecnología, ya que
poseen claves para la síntesis mejorada de nuevas
moléculas o moléculas optimizadas, creando condi-
ciones para su adaptación.
Agradecimientos
Este trabajo fue financiado por la Universidad An-
tonio Nariño (proyecto 2022207) y la Universidad
Colegio Mayor de Cundinamarca (Acuerdo 081 de
2020).
Contribución de los autores
DDPD; Conceptualización, investigación, trata-
miento de datos, visualización, escritura del borra-
dor original. SMET; Administración del proyecto.
SALP; Conceptualización, investigación, adminis-
tración del proyecto, tratamiento de datos, visua-
lización, escritura del borrador original, escritura-
revisión y edición.
Referencias
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